dna复制的基本特征 HBV-DNA HBV-DNA-基本分类,HBV-DNA-复制过程

HBV-DNA即是乙肝病毒的脱氧核糖核酸(即乙肝病毒基因)。 HBV-DNA是HBV感染最直接、特异性强和灵敏性高的指标,HBV-DNA阳性,提示HBV复制和有传染性。HBV-DNA越高表示病毒复制越厉害,传染性强。

hbv-dna_HBV-DNA -基本分类


HBV-DNA称为乙肝病毒脱氧核糖核酸。病毒从结构上分为两类,一类是RNA病毒(核糖核酸病毒),
HBV-DNA结构示意图另一类是DNA病毒(脱氧核糖核酸病毒),乙肝病毒属于后者。病毒与细菌不同,细菌体内含有两种核酸(RNA和DNA),而病毒体内只含有一种核酸,或RNA或DNA。核酸是病毒的核心部分,病毒的基因都在这里,没有核酸,病毒就不能复制。

hbv-dna_HBV-DNA -复制过程

不同于一个真正的生物体,病毒并不通过生长和分裂等方式繁殖自身,而是像铸造机器零件一样,按照一定的模具拷贝出来的。病毒DNA中包含有一些程序,指导病毒的遗传物质和其它一些结构蛋白组分增殖。另外,病毒DNA中还包含有一些信息,使得单一组分能够在细胞因子的帮助下,自发组装成新的病毒颗粒。
在医学上,病毒的繁殖被称之为“复制”,在复制的过程中,有两个很重要的因素:一个是催化剂,另一个是模板。没有这两个因素,乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒DNA(即HBV-DNA)聚合酶。没有这种聚合酶的作用,乙肝病毒的复制就会停止。
乙肝病毒的基因组(HBV-DNA)是由两条螺旋的DNA 链围成的一个环形结构。其中一条较长负链已经形成完整的环状;另一条长度较短的正链,呈半环状。在感染肝细胞之后,这条半环状的DNA链就会以负链为模板,在催化剂──HBV-DNA聚合酶的作用下延长,最终形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因组就形成了一个完全环状的双股DNA。把这种DNA称做共价闭合环状DNA(即cccDNA),可以把它看作是病毒复制的原始模板,模板形成后,病毒基因会以其中的一条cccDNA为模板,利用肝细胞基因中的酶和DNA 聚合酶的“催化”,一段基因又一段基因地复制,形成负链和正链。最后再装配到一起形成新的HBV-DNA颗粒。

hbv-dna_HBV-DNA -HBV感染初期cccDNA的形成

研究证实,HBVcccDNA是最先能检测到的复制中间体.HBV特异的RNA,单链DNA(ssDNA)均晚于cccDNA形成,因此认为cccDNA是病毒前基因组RNA转录的模板.52溴脱氧尿嘧啶标记分析显示rcDNA在胞浆经逆转录合成,是核内病毒cccDNA扩增池的主要前体.鸭肝细胞体外感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)证实,在病毒产生前的感染早期,核内就能检测到50至100个拷贝cccDNA分子,说明核内cccDNA扩增池的形成不需要多轮感染.在感染细胞内,病毒的持续存在也可能依赖于转录活性cccDNA分子池的大小.Tuttleman等研究发现DHBV接种鸭肝细胞原代培养后8~12d,细胞核内DHBVDNA分子增加超过100倍,胞内rcDNA,ssDNA水平则仅增加2~4倍.这种早期cccDNA分子扩增发生时,在培养细胞的上清液中尚不能检测到完整的感染病毒颗粒.

在实验的基础上,专家提出在感染的早期阶段细胞核内cccDNA合成的途径为:病毒进入细胞后,在胞浆内脱壳,DNA的正链在DNA聚合酶作用下形成全长的rcDNA.rcDNA被转运至核内构象发生改变形成cccDNA,作为HBV部分基因的mRNA和前基因组RNA的合成模板.前基因组RNA在核内转录后转运到胞浆,经组装进入复合体内,复合体由病毒核心蛋白以及P蛋白组成.以前基因组RNA为模板通过逆转录合成HBVDNA负链.前基因组降解后,剩下负链DNA作为正链DNA的合成模板.新合成的双链中的正链大多不完整.包含完整或部分正链的核衣壳核心包装进病毒包膜运出细胞成为成熟的病毒体,但也可在胞浆内脱壳形成rcDNA被转运至核内以补充cccDNA的量.一个感染病毒体在感染肝细胞后只产生一个cccDNA分子,但在处于稳定感染的每个肝脏细胞内大约有50~100个cccDNA拷贝,其原因就是rcDNA又在胞内转换成cccDNA.

hbv-dna_HBV-DNA -基本参数


通常低于10的3次方,就结论为阴性,报告上写阴性,或“<10的3次方”。HBV-DNA检查非常灵敏,在同一数量级变化通常不能说明病毒变化,例如2X10的5次方和5X10的5次方很可能就是没有变化,但2X10的5次方和2X10的4次方,就有变化了。
需要指出的是,HBV-DNA阳性的乙肝携带者未必需要治疗,还要结合转氨酶(ALT)水平。一般来说,只有当转氨酶大于正常值的2倍时,才应考虑治疗;HBV-DNA值的多少和肝损伤的程度没有直接的关系。乙肝大三阳携带者的HBV-DNA一般都比较高,但肝损伤未必就严重,因为乙肝病毒本身并不直接伤害肝细胞。不过一般来说,HBV-DNA检查结果是可以做为乙肝患者抗病毒治疗的标准的,一般超过正常值范围的话,乙肝患者就需要进行乙肝抗病毒治疗。当检查出乙肝DNA高时,一定要引起足够的重视,说明病毒活动剧烈,复制频繁,不及时治疗会给机体带来很大的危害。同样,当检查结果显示阴性或者1000以下时,是不是就不需要治疗了呢?当然不是!

hbv-dna_HBV-DNA -检测意义

乙肝病毒变异耐药检测有两个意义,一个是乙肝病毒DNA定性检测,一个是定量检测,另外还有一个是基因分形和耐药的变异,定性检测比定量要求高,在这点国内是比较忽视的。
还有定量的问题,强调用干扰素和核苷类似物进行抗病毒治疗,无论是哪一种药物的治疗,乙型肝炎病毒的滴度和阴转都是考核抗病毒治疗的硬性指标,所以这项检测指标是非常重要的,而且在很多药物治疗过程中,乙肝病毒DNA下降的速度和幅度对于抗病毒治疗应达的疗效具有重要的预测价值,所以是非常重要的。第三点要对乙肝病毒进行基因分形和耐药变异问题测定,比如说有的病人服药之后从阴性转成阳性,还有乙肝病毒DNA的升高,这样的病人要充分重视是否产生了耐药变异,这个检测对医生更换药物或者更换治疗方案是非常有关系的。

检查HBV-DNA的重要意义

(1)如果一个人的血液中HBeAg阴性,抗―HBe阳性,一般说这是HBv的非复制期,传染性明显减弱然而,自开展HBvDNA检测以来,发现这些人血清中的HBvDNA仍为阳性。

原来HBv是一种极易变异的病毒(所有病毒都有能变异的特性),由于变异,血清中的HBeAg消失了,而其主宰HBv复制的HBvDNA却仍然是阳性,当然仍有传染性,HBv仍在复制。所以,不能轻易说HBeAg转阴、抗―HBe转阳就没有病毒活跃了,更不能说没有病毒复制了。单检测“两对半”还不能充分说明人体内HBv的实质。特别是乙肝病人,出现“小三阳”病情应当好转,但有时不但不好转,反而加重,一查HBvDNA是阳性,答案就找到了,原来HBv已变异,仍然在复制,还是HBv惹的祸。

(2)有时,在一个人的血液中只检测到“两对半”中的一项阳性,如仅仅HBsAg阳性,或仅仅抗―HBc阳性,这时我们只能说是可能有HBv感染,不能确定HBv有无复制,有无传染性,因此,必须检测HBvDNA;如果为阳性,还是说明HBv有复制、有传染性。

(3)有少数人检测乙肝“两对半”时都是阴性,但他的转氨酶却很高,提示肝脏有损伤,而肝脏损伤的原因一时还找不到,如果检测――下HBvDNA,为阳性,那么答案就找到了,这也是HBv感染,可确诊为“隐匿性乙肝”。

(4)大家已经知道,在一个人的血液中检测到了抗―HBs,说明这个人过去感染过HBv,现在感染已经结束,并产生了对乙肝病毒的免疫力,或乙肝已痊愈。但是医生们发现,少数人虽然抗―HBs阳性,但HBvDNA也是阳性。按理说这种情况不应当出现在一个人身上,其实这也是HBV变异的一种表现形式。原先感染的HBv可能已被清除,又感染了变异的HBv,故血液中HBvDNA仍是阳性。

总之,在乙肝病毒感染者的血液中一旦检查到了HBvDNA,就提示有HBv复制,有传染性;由此可见,检测“两对半”和HBvDNA可以相互补允。两者不能相互代替,不管乙肝病人还是乙肝带毒者,都应争取检测HBVDNA,以便对HBv进行全面、准确地分析。

hbv-dna_HBV-DNA -检测结果分析

1、乙肝病毒e抗原呈阳性的慢性乙肝患者HBVDNA>105,或乙肝病毒e抗原呈阴性的慢性乙肝患者HBVDNA>104,ALT升高超过正常值上限2倍以上,通常采用抗病毒治疗。(部分医院参考值为10的3次方)
2、抗病毒治疗前HBV-DNA值的高低与疗效有关,若HBVDNA>1010,但ALT增高不明显,这时抗病毒效果较差。
3、治疗前的HBV-DNA检测结果是区别乙肝病毒e抗原阴性乙肝患者与乙肝病毒e抗原非活动性携带的唯一标识。HBV-DNA检查分为HBV-DNA定量检查和HBV-DNA定性检查,HBV-DNA定量检查数值超过10的5次方或者HBV-DNA定性检查显示为阳性的话,往往表示患者体内乙肝病毒复制活跃。

hbv-dna_HBV-DNA -哪些人需要进行HBV―DNA检测

1、已有明确的乙肝病毒(HBV)感染,目前肝功能出现波动者,应行HBV-DNA检测,以明确病毒复制情况,以助于判断目前肝功能是否与病毒活动有关;
2、慢性乙肝病人正在使用抗病毒药物或近期内准备使用抗病毒药物者,定期检测HBV-DNA,可有助于判断目前所使用的抗病毒药物的疗效。
3、慢性乙肝所致的肝硬化,近期内病情反复波动者,检测HBV-DNA可了解目前病毒复制情况,必要时可选用抗病毒药物,以有效控制病情的反复及进展。
4、乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阴性的慢性乙肝病人,此类病人可能存在有HBV的变异,应行HBV-DNA检测,明确体内是否存在有HBV的复制以及病毒变异。
5、慢性乙肝病人,近期内暂不打算行抗病毒治疗者,应定期检查HBV-DNA、肝功能以及两对半等,以帮助选择合适的机会进行抗病毒治疗。[1]
6、血清HBeAg阴性/抗HBe阳性的慢性乙肝病人,此类病人可能存在有乙肝病毒的变异,因此也应进行HBV-DNA检测,必要时加用抗病毒治疗。

hbv-dna_HBV-DNA -HBV-DNA多久检查一次

HBV-DNA检查是判断乙肝病毒在体内的数量,复制是否活跃,判断其传染性大小的重要指标。HBV-DNA检查对乙肝病情的监控、确诊、治疗有着重要的意义。HBV-DNA检测还可以判断患者是否需要接受乙肝抗病毒治疗。
而HBV-DNA多久检查一次应该根据乙肝患者的实际情况而定,不同的患者,由于病情的不同,乙肝病毒DNA检查的时间也是不同的,即使是同一个患者在不同病情阶段HBV-DNA多久检查一次的时间也是不同的。具体情况如下:
1、如果乙肝患者处于病毒的活动期,则需要1-2个月检查一次。
2、如果乙肝患者在接受乙肝抗病毒治疗,则需要至少3个月检查一次。
3、如果乙肝患者的病毒处于耐受期的话,一般3-6个月检查一次。

hbv-dna_HBV-DNA -与乙肝两对半的区别

dna复制的基本特征 HBV-DNA HBV-DNA-基本分类,HBV-DNA-复制过程
HBV-DNA和乙肝两对半的区别主要表现在:
一、乙肝两对半,是用来排查机体有无感染乙肝病毒,对于乙肝传染性强弱仅能做一个初步的估计指标。
HBV-DNA检查,是用来检查乙肝患者体内的乙肝病毒数量、复制指标,能够能为精确的判断出乙肝病毒在体内的复制、传染强弱情况。
二、应两对半检查,反应出体内抗原、抗体的携带模式,检测在一定条件下机体的免疫情况,同时可为乙肝病毒感染提供间接证据。
HBV-DNA检查,才是证实乙肝病毒存在的直接证据,是诊断的有力依据。如果是阳性而且乙肝病毒载量很高,就必须治疗有的人因病情反复,可引起肝硬化;有的则因乙肝病毒DNA和人肝细胞的DNA发生整合,会促使癌变。
两者虽然可反映乙肝病毒复制,传染性强,乙肝DNA检查是对乙肝两对半检查不足的补充。但需注意的是不管乙肝两对半检查,还是HBV-DNA检查,均不能有效反映肝脏的受损状况、及乙肝病情的轻重,为此患者要想及时明确,还需及时进行肝功能、肝脏影像学等相关检查,准确的检查结果,对诊断乙肝病情有着重要的意义。

  

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