化学物质:双缩脲试剂(biuret reagent)是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成。用于验证蛋白质的存在双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。制备0.1 g/mL的氢氧化钠水溶液和0.01 g/mL的硫酸铜水溶液,现配现用。
双缩脲_双缩脲试剂 -解释
双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成.双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;
双缩脲试剂
双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。
双缩脲_双缩脲试剂 -具体方法是
先将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀,在加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。双缩脲_双缩脲试剂 -应用
双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。
H2O
O=CC=O
双缩脲试剂HNNH
R-CHCH-R
O=CCuC=O
HNNH
R-CHCH-R
H2O
试剂作用
双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。
具体方法是:
先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,振荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色。
双缩脲_双缩脲试剂 -注意事项
在使用双缩脲试剂时候,必须注意,必须是先加0.1g/mL氢氧化钠溶液,再加0.01g/mL硫酸
双缩脲试剂铜的水溶液。(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液,再加入氢氧化钠[NaOH]溶液,则无法充分制造碱性环境,此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应,生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀,导致现象不清,无法较好地达到实验目的.