石蜡包埋切片步骤 石蜡包埋

石蜡包埋切片步骤 石蜡包埋

目前培养组织细胞和脱落细胞涂片常用的HE染色、特殊染色以及免疫组化染色存在着许多缺点。培养细胞和脱落细胞具有完整的细胞膜,虽经95%乙醇或丙酮固定,其细胞膜上的类脂质常不能充分溶解,影响了染料和抗体的渗透,细胞往往着色不良,结构不够清晰,免疫组化染色常造成假阴性的结果,有时难以确定阳性或阴性和判断阳性着色的部位。虽可用TritonX-100进行前处理以增加细胞膜的通透性,但其浓度、时间等不易掌握。用福尔马林固定后经梯度乙醇脱水和二甲苯处理的细胞石蜡包埋切片,可避免上述缺点,并且细胞集中、密度高、便于观察,所有的细胞都可被收集起来,提高了细胞的阳性检测率。

制作石蜡切片,切片前须将石蜡渗透组织包埋于石蜡中,而水与石蜡又是不相混合的,所以在浸蜡,包埋前必须将组织内所含的水分脱去。而大多数的组织固定剂是水溶液,随后的水冲洗也使其含有大量水分,因此必须先行脱水,一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。由于酒精和石蜡不能混合,须再用一种石蜡的溶剂来置换酒精,因大多数石蜡溶剂有使组织的折光率增高并表现为透明或半透明状,所以此步骤又称透明。最后用石蜡浸渍组织并铸制成坚实的蜡块。

常规的石蜡包埋过程包括五个基本步骤,即固定,脱水,透明,浸蜡和包埋,前一章中已述过固定。

  

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