基因工程原理与技术 基因工程原理与技术-图书信息,基因工程原理

基因工程原理_基因工程原理与技术 -图书信息

书 名: 基因工程原理与技术

基因工程原理与技术 基因工程原理与技术-图书信息,基因工程原理
作者:刘志国

出版社:化学工业出版社

出版时间: 2011年1月1日

ISBN: 9787122100641

开本: 16开

定价: 38.00元

基因工程原理_基因工程原理与技术 -内容简介

《基因工程原理与技术(第2版)》根据目前生命科学领域中基因工程技术的研究与应用现状,结合普通高等院校生物类本科专业的教学特点和培养目标要求,以应用实际为基础,系统介绍基因工程的基本原理与技术,及其在相关领域的应用、最新进展和未来发展方向。主要包括三方面内容:一是基因克隆的理论与技术基础,包括基因与基因表达的基本原理,核酸的分离、分析、酶切、连接、修饰的原理和技术,以及基因工程载体的特点与运用:二是基因克隆、表达的基本原理与技术及其应用,其内容主要有:目的基因克隆的原理与技术、目的基因在原核与真核生物中表达的原理与技术:三是基因工程技术的发展与应用,主要介绍基因工程相关的技术发展及在相关领域的应用和基因工程产品的管理、专利及安全性问题。

本教材适合作为普通高等院校生物类专业及相关专业基因工程课程的教材或参考书。

基因工程原理_基因工程原理与技术 -图书目录

第一章 概论1

一、基因工程的概念与基本步骤1

二、基因工程技术的发展历程2

三、基因工程的研究内容5

第二章 基因与基因表达调控7

第一节 基因的结构与功能7

一、基因的分子基础7

二、结构基因的基本结构8

三、原核生物基因结构与调控模式8

四、真核生物基因结构与调控模式9

五、特殊结构与功能的基因11

第二节 基因组的结构与功能13

一、病毒基因组的结构与功能特点13

二、原核生物基因组的结构与功能特点14

三、真核生物基因组的结构与功能特点15

四、线粒体基因组15

五、人类基因组16

第三节 基因的表达与调控17

一、基因表达调控的(基本)原理18

二、原核生物的基因表达调控20

三、真核生物的基因表达调控24

本章小结29

思考题30

第三章 核酸的分离与分析31

第一节 核酸的分离纯化31

一、核酸分离提取的原则与要求31

二、核酸提取的主要步骤31

三、质粒DNA的分离纯化33

四、基因组DNA的制备35

五、RNA的提取35

六、核酸的定量36

第二节 核酸的凝胶电泳37

一、琼脂糖凝胶电泳37

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳38

三、凝胶电泳分离后核酸片段的回收及纯化39

第三节 聚合酶链式反应(PCR)40

一、PCR技术的基本原理及特点40

二、PCR反应体系与条件优化42

三、PCR技术拓展与应用45

第四节核酸分子杂交技术47

一、核酸杂交的原理47

二、核酸探针的制备47

三、核酸杂交种类与方法53

本章小结59

思考题59

第四章 核酸分子的酶切、连接和修饰61

第一节 DNA分子的酶切61

一、限制性核酸内切酶61

二、限制性内切酶切割DNA的方法64

三、影响限制性内切酶活性的因素66

四、DNA酶切的应用68

第二节 DNA分子的连接68

一、连接酶69

二、黏性末端DNA片段的连接70

三、平末端DNA片段的连接70

四、影响连接反应的因素72

第三节 DNA分子的修饰73

一、DNA修饰酶73

二、T4多聚核苷酸激酶对DNA的修饰作用74

三、碱性磷酸酶对DNA的修饰作用75

本章小结75

思考题76

第五章 基因工程载体77

第一节 质粒载体77

一、质粒的一般生物学特性77

二、理想质粒载体的必备条件78

三、常用的质粒载体79

第二节噬菌体载体82

一、噬菌体载体的生物学特性82

二、λ噬菌体载体83

第三节 其他载体88

一、酵母载体89

二、人工染色体载体91

第四节 表达载体94

一、原核表达载体94

二、真核表达载体95

本章小结100

思考题101

第六章 目的基因克隆102

第一节 PCR扩增法获得目的基因102

一、RT?PCR法102

二、其他PCR法104

第二节 基因的合成109

一、DNA合成的原理109

二、人工合成基因110

第三节 基因组DNA的克隆112

一、基因组文库的构建和检测112

二、大片断文库在环境基因组中的应用115

第四节 cDNA文库构建及筛选116

一、RNA提取与质量鉴定116

二、cDNA文库构建119

三、cDNA文库的质量评价120

第五节 差异克隆技术121

一、mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)121

二、抑制性差减杂交123

第六节 DNA诱变124

一、定点突变125

二、随机突变128

第七节 转化、筛选与鉴定129

一、重组DNA导入受体细胞129

二、重组子的筛选与鉴定133

三、DNA序列测定136

本章小结139

思考题140

第七章 原核细胞基因工程141

第一节 原核表达体系141

一、宿主菌141

二、原核表达载体143

三、密码子偏好148

四、质粒拷贝数149

第二节 原核表达策略149

一、包含体型表达149

二、分泌型表达150

三、融合型表达150

四、其他表达151

第三节 基因工程菌的大规模培养152

一、基因工程菌发酵的特点152

二、基因工程菌的深层培养方式153

三、相关发酵的反应器155

第四节 原核表达产物的分离纯化156

一、分离纯化的目标与策略156

二、分离纯化的一般过程158

三、包含体的溶解和重组蛋白的复性160

四、分泌蛋白质的浓缩161

第五节 基因工程菌不稳定性及对策162

一、基因工程菌不稳定性产生的原因162

二、改善基因工程菌不稳定性的方法163

第六节 原核表达应用举例165

本章小结166

思考题166

第八章 酵母基因工程168

第一节 酵母基因工程表达体系168

一、酵母基因表达宿主系统168

二、酵母表达载体171

三、转化方法173

第二节 常见酵母基因表达系统174

一、酿酒酵母表达系统174

二、毕赤酵母表达系统176

第三节 影响外源基因表达的因素179

一、转录水平控制179

二、表达载体的拷贝数和稳定性179

三、其他因素180

四、酵母表达系统的新的应用方向180

第四节 酵母基因工程应用举例181

一、利用重组酵母生产乙肝疫苗181

二、利用重组酵母生产人血清白蛋白182

本章小结183

思考题183

第九章 动物基因工程184

第一节 动物细胞基因工程184

一、动物细胞表达体系184

二、动物细胞表达载体的构建与优化188

三、动物细胞转化方法与筛选191

第二节 转基因动物194

一、转基因动物概念194

二、哺乳动物的转基因操作194

三、外源基因的整合与表达199

第三节动物转基因技术的应用前景202

一、基因功能的研究202

二、在农业上的应用203

三、在医学上的应用204

本章小结205

思考题206

第十章 植物基因工程207

第一节 植物基因工程中的转基因受体207

一、高等植物的遗传学特性207

二、愈伤组织受体系统208

三、原生质体209

四、种质受体系统209

五、胚状体受体系统210

六、直接分化芽受体系统210

第二节 植物基因工程载体210

一、植物基因工程载体的种类和特性210

二、植物基因工程载体的构建211

第三节 高等植物基因的表达系统215

一、外源基因的四环素诱导系统215

二、外源基因的乙醇诱导系统216

三、外源基因的类固醇诱导系统217

第四节 植物转基因方法218

一、根癌农杆菌介导法218

二、基因枪法220

三、花粉管通道法222

四、其他转基因方法223

第五节 转基因植物筛选与鉴定225

一、生物学筛选225

二、标记基因的表达检测225

三、目的基因及其表达的分子鉴定227

第六节 植物基因工程应用举例228

一、基因工程生产转基因黄金水稻228

二、抗虫害的转基因植物228

三、抗除草剂植物的育种229

本章小结229

思考题230

第十一章 基因工程相关新技术231

第一节 生物信息学231

一、生物信息学概述231

二、生物信息学数据库231

三、生物信息的检索及策略232

四、序列比对分析232

五、核酸序列分析234

六、蛋白质结构分析236

第二节 芯片技术238

一、基因芯片的原理238

二、基因芯片的种类238

三、基因芯片制作技术的基本步骤240

四、基因芯片技术的应用241

第三节 蛋白质组学与酵母双杂交242

一、蛋白质组学242

二、酵母双杂交245

本章小结247

思考题247

第十二章 重组DNA技术的应用248

第一节 DNA与疾病诊断248

一、基因诊断的含义248

二、基因诊断的原理及特点249

三、基因诊断的方法249

四、基因诊断的应用252

五、问题及展望254

第二节 疾病的基因治疗254

一、基因治疗的概念及内容255

二、基因治疗的分子机制255

三、载体系统256

四、基因治疗的策略与方法256

五、疾病的基因治疗示例257

六、问题及展望259

第三节 传染病的防治259

一、新发和再发传染病的特征260

二、传染病防治的新策略及研究内容260

三、基因工程疫苗261

四、基因工程抗体264

五、DNA重组技术在传染病防治中应用的前景与展望264

第四节 蛋白质工程265

一、蛋白质工程的概念与研究内容265

二、蛋白质工程分子设计的理性策略266

三、蛋白质定向改造的方法266

四、蛋白质工程的应用266

五、蛋白质工程前景与展望268

第五节 途径工程268

一、途径工程的基本概念268

二、途径工程的基本原理269

三、途径工程的基本过程269

四、途径工程的研究内容270

五、途径工程前景及展望272

本章小结272

思考题272

第十三章 基因工程产品的管理、专利及安全性273

第一节 实验室管理要求273

一、实验室生物安全管理的概念和依据273

二、实验室生物安全管理的硬件要求274

三、一般实验室的基本生物安全规程275

第二节 基因工程产品的释放、管理与要求275

一、基因工程产品的释放275

二、基因工程产品的管理277

三、基因工程产品的管理要求与具体措施278

第三节 专利管理280

一、基因工程产品的专利保护的必要性280

二、基因工程产品专利保护的争议281

三、对基因产品实现专利保护的条件――三性要求283

本章小结284

思考题284

索引285

参考文献288

  

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