衣原体(chlamydia)包括沙眼衣原体(C.trachomatis)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)和肺炎衣原体(C.pneumonia)3种。沙眼衣原体又分为沙眼、性病淋巴肉芽肿(lymphogranulomavenereum,LGV)和鼠生物变种3个生物变种。沙眼衣原体生物变种有A~K18个血清型,其中A、B、Ba、C引起沙眼,D~K型引起泌尿生殖道感染,如包涵体结膜炎、非淋菌性尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、附睾炎、直肠炎、新生儿肺炎和中耳炎等。衣原体性泌尿生殖道炎是目前世界最多的性病之一。性病淋巴肉芽肿变种有L1、L2、L2a、L34个血清型,可引起性病淋巴肉芽肿。鼠生物变种不引起人的疾病。鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体引起呼吸道感染,特别是肺炎。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -简介
《伯氏系统手册》(1984)的记载,将沙眼衣原体Chlamydia trachomatis 分为3个生物型,即小鼠生物型(biovar mouse)、沙眼生物型(biovar trachoma)和性病淋巴肉芽肿生物型(biovar lymphogranulomavenereum,LGV)。后二者与人类疾病有关。用间接微量免疫荧光试验,沙眼生物型又分A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K14个血清型,LGV生物型又有L1、L2、L2a、L34个血清型。
沙眼衣原体是一类在细胞内寄生的微生物,大小约250~450nm。衣原体不耐热,在室温下迅速丧失其传染性,加温至50℃,30分钟即可将其杀死。但是衣原体耐寒,-70℃下能存活数年。四环素、红霉素、氯霉素对它有抑制作用,而链霉素、新霉素对它则无效。常用的消毒剂如 0.1%甲醛、0.5%石炭酸可将衣原体迅速灭活。
主要特性
沙眼衣原体
1. 革兰氏阴性,圆形或椭圆形;
2. 含DNA和RNA以及核糖体;
3. 具有由黏肽组成的细胞壁,其结构和组成类似于G-,但细胞壁酸缺少或只含微量;
4. 有较复杂的、能进行一定代谢活动的酶系统,但 不能合成带高能键的化合物,须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源,必须在活细胞内生存;
5. 具有独特的发育周期,并以二等分裂方式繁殖,形成包涵体。
6. 对许多抗生素、磺胺药敏感,能抑制生长。
生物学特性
(一)形态与染色
将鸡胚卵黄囊或细胞培养的沙眼衣原体高度提纯,于电镜下检查,可见原体呈球形或类球形,胞浆膜外有刚性细胞壁,壁外有平滑表层。始体的体积较大,形状不甚规则,其包膜富有韧性,无刚性的细胞壁,原体和始体内皆含有DNA与RNA。
沙眼衣原体
沙眼衣原体具有特
殊的染色性状,不同的发育阶段其染色有所不同。成熟的原体以Giemsa 染色为紫色,与监色的宿主细胞浆呈鲜明对比。始体以 Giemsa 染色呈蓝色。沙眼衣原体对革兰氏染色虽然一般反应为阴性,但变化不恒定。沙眼包涵体
在上皮细胞浆内,很致密,如以Giemsa染色,则呈深紫色,由密集的颗粒组成。其基质内含有糖原,以Lugol液染色呈棕褐色斑块。
(二)培养
人类是沙眼衣原体的自然宿主。它主要寄生于机体粘膜上皮细胞。猴和猩猩的眼及泌尿系可实验感染各型沙眼衣原体(包括LGV在内)。灵长类外的动物,对LGV之外的其他沙眼衣原体均无致病性。鸡胚只对大多数沙眼衣原体敏感,但禽类则对各型沙眼衣原均不敏感。小白鼠对LGV衣原体是敏感的,尤其是脑内感染,病死率可达30%。此外,大白鼠、豚鼠和家兔对LGV衣原体的敏感性幼龄高于成年。所有沙眼衣原体都能在鸡胚卵黄囊内生长繁殖,并致死鸡胚。将沙眼衣原体悬液接种6~8天胚龄卵黄囊内,置35℃温箱,一般于6~8天后死亡。剖检时胚体及卵黄囊膜充血。卵黄囊膜涂片可散在衣原体,病理切片则可见卵黄囊膜细胞内包涵体。
所有沙眼衣原体均可在细胞培养液中生长,现多采用McCoy或HeLa229细胞株,在接种衣原体前,以X线照射细胞,或于细胞培养中加入代谢抑制如细胞松弛素B、DEAE葡聚糖呈放线菌酮,其目的在于细胞生长代谢缓慢,以利于衣原体的寄生性生长。 (三)抵抗力
1. 沙眼衣原体对热、脂溶剂和去污剂以及常用的消字号洗液均十分敏感。
2. 对煤酚类化合物及石炭酸等一般较能抵抗。
3. 对PHMB、利福平、四环素、红霉素、磺胺敏感;
对青霉素不敏感
治疗选用洁阴洗液等
治疗沙眼衣原体感染的误区
那么,沙眼衣原体到底是一种什么东西呢?我们知道,人体内并不是一个绝对无菌的环境,仅在男性尿道、女性阴道内就有20多种微生物生存。这些微生物有好的,有坏的,它们相互制约,构成一个平衡状态。从前衣原体被划归病毒,后来发现自成一类。它是一种比病毒大、比细菌小的原核微生物,呈球形,直径只有O.3-0.5微米,它无运动能力,沙眼衣原体广泛寄生于人类,哺乳动物及鸟类,仅少数有致病性。 能引起人类疾病的有沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热肺炎衣原体。衣原体对热敏感,在60℃仅能存活5~10分钟。衣原体耐冷,在-70℃可保存数年,冷冻干燥可保存30年以上。常用消毒剂,如含PHMB杀菌成分的洁阴洗液也能迅速杀灭衣原体。红霉素、强力霉素和四环素等有抑制衣原体繁殖的作用。不论是婴儿还是老人,生殖道中均可能有衣原体的寄居,在成年男女生殖道中的检出率非常高。而这些人没有任何症状。这说明这种“沙眼衣原体阳性”是正常情况,不需要任何治疗。阴道的弱酸性环境能保持阴道的自洁功能,正常人为3.7-4.5,因此用Ph4弱酸配方的女性护理液除了适合日常的清洁保养外,衣原体阳性期间使用弱酸配方的女性护理液对衣原体的生长繁殖会有抑制作用。外出如厕时要用女性卫生湿巾拭干外阴,保持外阴干燥,以抑制衣原体的生长。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -正常值
1:8(补体结合试验CF)。
阴性(聚合酶链反应法PCR、酶联免疫吸附分析法ELISA、免疫荧光测定法)。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -所致疾病
(一)沙眼:由衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起。主要经直接或间接接触传播,即眼~眼或眼~手~眼的途经传播。当沙眼衣原体感染眼结膜上皮细胞后,在其中增殖并在胞浆内形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵体。该病发病缓慢,早期出现眼睑结膜急性或亚急性炎症,表现流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血等症状与体征。后期移行为慢性,出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜损害,以致影响视力,最后导致失明。据统计沙眼居致盲病因的首位。1956年我国学者汤飞凡等人用鸡胚卵黄囊接种法,在世界上首次成功地分离出沙眼衣原体,从而促进了有关原体的研究。
(二)包涵体包膜炎:由沙眼生物变种D~K血清型引起。包括婴儿及成人两种。前者系婴儿经产道感染,引起急性化脓性结膜炎(包涵体脓漏眼),不侵犯角膜,能自愈。成人感染可因两性接触,经手至眼的的途径或者来自污染的游泳池水,引起滤泡性结膜炎又称游泳池结膜炎。病变类似沙眼,但不出现角膜血管翳,亦无结膜瘢痕形成,一般经数周或数月痊愈,无后遗症。
显微镜下的沙眼衣原体
(三)泌尿生殖道感染:经性接触传播,由沙眼生物变种D~K血清型引起。男
性多表现为尿道炎,不经治疗可缓解,但多数转变成慢性,周期性加重,并可合并副睾炎、直肠炎等。女性能引起尿道炎、宫颈炎等,输卵管炎是较严重并发症。该血清型有时也能引起沙眼衣原体性肺炎。
(四)性病淋巴肉芽肿:由沙眼衣原体LGV生物变种引起。LGV要通过两性接触传播,是一种性病。男性侵犯腹股沟淋巴结,引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿。女性可侵犯会阴、肛门、直肠,出现会阴~肛门~直肠组织狭窄。
感染症状
其中A、B、Ba及C型的衣原体株能引起沙眼,L1、L2、L3型能引起性病性淋巴肉芽肿, D-K型则引起非淋菌性尿道炎。沙眼衣原体是引起非淋菌性尿道炎的主要病原体,由前述可知,非淋菌性尿道炎的40%~50%是由沙眼衣原体感染引起的。沙眼衣原体感染目前已是西方国家最常见的性传播疾病之一,发病人数增加很快,已超过淋病。在中国,沙眼衣原体感染的患病人数也在迅速增加。
沙眼衣原体的患病人群以青壮年为主。感染后,潜伏期为数天到数月,一般是1~3周。感染沙眼衣原体后妇女最常见的是引起化脓性宫颈炎,出现脓性白带增多,可伴有外阴瘙痒。如果引起尿道炎时,约一半病人出现尿急、尿频和排尿困难,与淋病性尿道炎不同的是,沙眼衣原体引起的尿道炎无尿痛症状,或尿痛很轻微,可有少量的尿道分泌物。如果巴氏腺被感染,还能引起巴氏腺炎。一般而言,女性患者多数症状很轻,或者没有自觉症状,因此常被忽略,容易造成本病的传播。
妇科检查可见宫颈充血、肥大,有粘液脓性分泌物。由于沙眼衣原体感染常与淋病合并存在,且症状相似,因此临床上要与淋病相鉴别。常规取宫颈分泌物或尿道分泌物涂片,经革兰氏染色,如果未见到细胞内(外)革兰氏阴性双球菌,淋病双球菌培养也为阴性,就可以排除淋病感染。
检查取材时需将宫颈口分泌物拭净,然后将拭子或细胞刷伸入宫颈管内1-15厘米,放置1-2分钟并转动,作宫颈管内细胞取材。
沙眼衣原体除能引起化脓性宫颈炎、阴道炎、尿道炎外,还能经生殖道上行感染,有可能引起急、慢性输卵管炎,子宫内膜炎等盆腔炎症。治疗沙眼衣原体感染多采用口服抗生素,可选用强力霉素每次100毫克,每日服2次,首次剂量加倍,连续服7天;或红霉素每次0.5克,每日4次,连服7天;或美满霉素每次口服100毫克,每日2次,连服10天。孕妇用药可选红霉素,服药剂量、方法同前。
感染沙眼衣原体后在生活中要明确两点,既要积极治疗,又不要再将病原体传染别人。
(1)积极治疗是患者首先要重视的。由于服药方便,服药疗程亦不很长,因此患者只要予以重视即能完成治疗。患者的配偶应该同时参加检查和治疗。治疗后需要复查以确认是否痊愈。
(2)患病期间禁止性生活,直到痊愈为止。
(3)平时注意个人卫生:外阴部保持清洁干燥,每日换洗内裤。由于沙眼衣原体不耐高温,所用手巾、内裤可以煮沸消毒。个人的盆具个人使用,浴盆洗后及时消毒,不乱用别人的物品,以免造成疾病传播。
(4)红霉素可以用于孕妇的沙眼衣原体感染,安全性较好,因此孕妇患者也应该积极治疗,以防感染胎儿。
免疫性
机体感染衣原体后,能诱导产生型特异性细胞免疫和体液免疫。但通常免疫力不强,且为时短暂,因而常造成持续性感染、隐性感染和反复感染。此外,也可能出现免疫病理损伤,由迟发型超敏反应引起,如性病淋巴肉芽肿等。
微生物学诊断
多数衣原体引起的疾病可根据临床症状和体征确诊。但对早期或经症患者,须行实验室检查来帮助诊断。
直接涂片镜检
沙眼急性期患者取结膜刮片,Giemsa或碘液及荧光抗体染色镜检,查上皮细胞浆内有无包涵体。包涵体结膜炎及性病淋巴肉芽肿,也可从病损局部取材涂片,染色镜检,观察有无衣原体或包涵体。
分离培养
用感染组织的渗出液或刮取物,接种鸡胚卵黄囊或传代细胞,分离衣原体,再用免疫学方法鉴定。
血清学试验
主要用于性病淋巴肉芽肿的辅助诊断。常用补体结合试验,若双份血清抗体效价升高4倍或以上者,有辅助诊断价值。也可用ELISA、凝集试验。
PCR试验
设计不同的特异性引物,应用多聚酶链式反应可特异性诊断沙眼衣原体,具有敏感性高,特异性强的特点,现被广泛应用。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -防治原则
沙眼无特异的预防方法,疫苗在试用,效果不肯定。注意个人卫生,不使用公共毛巾和脸盆,避免直接或间接接触传染,是预防沙眼的重要措施。生殖道衣原体感染的预防同其他性病一样。
治疗一般用利福平、四环素、氯霉素、强力霉素及磺胺等药物。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -快速检测
衣原体按其特性分为三类:沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)、鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci)和肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)。沙眼衣原体有15个已知的血清型,其中12个血清型与沙眼和生殖道的感染有关;另外3个则与性病性淋巴肉芽肿(Lymphoganuloma Venereun, LGV)的发生有关。
其检测原理为:用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维素膜,并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成,应用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法,用于女性宫颈和男性尿道中衣原体的检测。从而达到检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在,临床辅助诊断衣原体感染,试验结果还需要临床医生结合患者症状、体征及其它检查结果进一步确定的目的。
金标法定性沙眼衣原体快速检测有着快速、方便、准确性高的优点。为临床医生的辅助诊断等节省了很多时间。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -注意事项
此试验操作繁杂,一般实验室不愿做。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -检查过程
(1)补体和溶血素的滴定。
①取补体1ml,加BBS 9ml,依次稀释成1:20,1:30,1:40,1:50,1:60,1:80,1:100,1:200,1:400,同时取50%的溶血素0.2ml,加BBS 9.8ml,即为1:100的溶血素,然后继续稀释成1:800,1:1600,1:3200,1:6400。
②采取方阵排列试管,纵行各管加不同浓度的补体0.1ml,横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后,各管加BBS 0.2ml,补体和溶血素对照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml,摇匀,放37℃水箱中30min,观察结果。
以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。溶血素1:3200为一个溶血素单位,补体1:80为一个补体单位。在实际应用时,溶血素用2u(3200÷2=1600),补体用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式试验:
①用V型微量反应板操作,每份标本作一个试验孔,一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。
②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋转后移入第二孔,共八孔,如此可得1:2~1:256稀释。
③加入各试剂:
(3)结果判断:凡对照组各管的结果应符合以下情况,否则应重做。
补体对照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊红细胞对照管:4。抗体对照管:0。阴性对照管;1:2~1:256=0。阳性对照管:同一份阳性血清,每次结果应一致。
当各测定管反应最强一管仍为±报告可疑,1~4报告阳性。如测定管和血清对照管均抗补体,全部测定管皆为0,报告阴性。
检查抗体的方法与检查抗原的方法一样,只是改用4个单位已知抗原,借以测定被检血清。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -不适宜人群
无检查适应症者不宜做此项检查。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -不良反应与风险
一般无并发症和危害。
衣原体包涵体_沙眼衣原体 -防治措施
沙眼衣原体是一种与性传播有关的病原体,多数通过不洁性交传播,少数是由于接触了被污染的衣物、器具和水源而受到传染。因此,对于育龄妇女来说,必须加强自我保护,重视性卫生和性安全环节,避免任何形式的不洁性交行为,避免接触那些受到污染的物品。