1、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵基因、一个启动子和一个调节基因。结构基因能产生一定的酶系统和结构蛋白。操纵基因控制结构基因的转录速度,位于结构基因和启动子之间,本身不能转录成mRNA。启动基因也不能转录成mRNA。调节基因可调节操纵基因的活动,调节基因能转录出mRNA,并合成一种蛋白,称阻遏蛋白或调节蛋白。
2、阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
3、CAP的正性调节:
CRP是cAMP受体蛋白(cAMP receptorprotein),cAMP(环腺苷酸)是细胞内广泛存在的第二信使。细菌中的cAMP含量与葡萄糖的分解代谢有关,当细菌利用葡萄糖分解供给能量时,cAMP生成少而分解多,cAMP含量低;相反,当环境中无葡萄糖可供利用时,cAMP含量就升高。cAMP浓度低,CRP未与cAMP结合,CRP不能被活化,当cAMP浓度升高时,CRP与cAMP结合并发生空间构象的变化而活化,称为CAP(CRP-cAMPactivatedprotein),能以二聚体的方式与特定的DNA序列结合。
CAP的通用名称是分解代谢基因激活蛋白(catabolic gene activatorprotein)。在启动子上游有CAP结合位点(CAP bindingsite),当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,增强RNA聚合酶的转录活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。
CAP结合位点就是一种起正性调控作用的操纵子。
4、协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。