磷酸盐缓冲液的配制 磷酸盐缓冲液的配制表

磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4:pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32
配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=1~4,
配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,
配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12。
用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH范围宽;③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.

pH

0.2mol/L NaH2 PO4(ml)

0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7

93.5

6.5

5.8

92.0

8.0

5.9

90.0

10.0

6.0

87.7

12.3

6.1

85.0

15.0

6.2

81.5

18.5

6.3

77.5

22.5

6.4

73.5

26.5

6.5

68.5

31.5

6.6

62.5

37.5

6.7

56.5

43.5

6.8

51.0

49.0

6.9

45.0

55.0

7.0

39.0

61.0

7.1

33.0

67.0

7.2

28.0

72.0

7.3

23.0

67.0

7.4

19.0

81.0

7.5

16.0

84.0

7.6

13.0

87.0

7.7

10.5

89.5

7.8

8.5

91.5

7.9

7.0

93.0

8.0

5.3

94.7

Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量= 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升.

  

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