贴壁细胞培养之更换培养液 更换细胞培养液

更换培养液

1、仔细检查所培养的细胞,观测是否有污染或发生细胞变性,一经发现,立即丢弃。

2、检查培养液的颜色如从红色变为黄色时,或细胞密度较大时估计培养液中的营养物质将耗竭,更换细胞培养液。一般一周至少更换二次培养液,不过大部分人是2到3天更换一次,这还要看自己所养细胞状态。我自己养的A549状态特别好的时候,几乎每天传代,更别说换液了。

3、在超净工作台内吸去或者倒出培养器皿中的旧培养液,(若采取倒的办法,要从细胞贴壁面的反面倒出)用PBS清洗(冲洗)一两次。另每次倒出后都要将瓶口过一下酒精灯火焰。

4、用吸管加入预热至36.5摄氏度到37摄氏度的新鲜完全培养液。(我图方便一般是直接倒)完全培养液一般由1*合成培养液+10%胎牛或小牛血清+100IU/ml青霉素和100mg/ml链霉素组成。

5、加入培养液的体积和培养器皿表面积之比应在0.2到0.5ml/cm2之间。若培养液层太深则影响氧气的弥散,若高浓度氧气需要细胞培养液层应较浅(2mm)。低浓度氧气需求的细胞系培养液层可较深(5mm)。(我自己的操作:一般小培养瓶加5-7ml,大培养瓶加10-15ml)

6、把培养细胞放回细胞培养箱中培养。(自己实际操作:在放入培养箱前显微镜下观察一下细胞状态以及细胞是否干净,用酒精棉球擦擦瓶外壁。)

贴壁细胞培养之更换培养液 更换细胞培养液

  

爱华网本文地址 » http://www.413yy.cn/a/25101014/227691.html

更多阅读

细胞损伤模型 细胞损坏了会怎样

1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h(贴壁良好)后,置培养皿于一密闭的塑料盒,内置四氯化碳0.4M容积,37度90min,造成肝细胞损伤的模型,后转入正常培养,进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后,吸弃上清,更换培养

慢病毒制备 透射电镜病毒样品制备

现今常用的制备慢病毒载体的方法为使用3或者4质粒系统转染293T细胞。此外,也有使用其它几类慢病毒包装细胞系制备慢病毒载体。瞬时转染制备慢病毒:细胞:慢病毒包装常用人胚肾细胞(HEK, human embryonickidney)293T,其含有SV40病毒的大

真伪难断 谭嗣同《狱中题壁》诗之谜 里海之谜如何查真伪

真伪难断 谭嗣同《狱中题壁》诗之谜  慈禧太后发动政变,幽禁光绪皇帝于南海瀛台,宣布自己临朝训政。同时,命荣禄派兵搜捕维新党人。谭嗣同等人被捕,被关进刑部北监。狱中,谭嗣同曾题诗一首,史称《狱中题壁》。然而,这一首诗的真伪至今仍

声明:《贴壁细胞培养之更换培养液 更换细胞培养液》为网友沧桑为引分享!如侵犯到您的合法权益请联系我们删除