爱华网
细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)有两种，硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGSHPx)与非硒谷胱甘肽过氧化物酶(non-SeGSHPx)，两者的区别在于其活性结构中是否含硒。non-SeGSHPx只能催化除H2O2外的过氧化物还原，而SeGSHPx则可催化H2O2及其他过氧化物还原。这里只介绍SeGSHPx的测定。
1．DTNB直接显色法原理是SeGSHPx催化H2O2及其他过氧化物还原的反应时，必须以GSH为底物，由GSH供氢，而GSH与5，5'-二硫代双，2-硝基苯甲酸(DTNB)生成黄色的5-硫代，2-硝基苯甲酸阴离子，测定该离子的浓度即可计算出GSH减少量，以此求得SeGSHPx活性。
2．酶偶联连续监测法原理是SeGSHPx催化H2O2及其他过氧化物使GSH氧化成GSSG，在NADPH及GSH还原酶作用下，GSSG重新转变为GSH，同时NADPH转变成NADP+，在这一过程中340nm处的光吸收下降，其下降程度可确定SeGSHPx活性。本法特异性强、灵敏度高，很适用酶含量不高的样品。但此法需GSH还原酶，后者的成本高是本法的缺点。
3．荧光测定法 原理源自于GSH的荧光分析法。
2GSH + H2O2 --→ GSSG +2H2O
GSH + OPA --→ 荧光复合物
随着反应的进行，GSH不断被消耗，经一定时间的酶反应后，中止反应，剩余的GSH与邻苯二甲醛(OPA)在一定pH条件下生成较特异性的荧光复合物，通过测定其荧光强度即可测定SeGSHPx活性。
