球虫病及中药防治研究进展 天牛防治研究进展

球虫类是家禽家畜体内极为常见的寄生虫,呈世界性分布,其中的一些种类可引起十分严重的疾病,特别是新发现的一种球虫病--犬新孢子虫(Neosporacaninum)更为严重。球虫感染在正常情况下,具有自限性(self-limited),一般来说,感染后随之对再感染(reinfection)的能够获得免疫力,不再患病。在自然条件下,动物感染上少量的卵囊仅出现轻微反应;但是在拥挤情况下,例如很挤的牲畜圈中,大量的卵囊可被摄食,从而引起严重的或致死性的感染,特别是幼畜,更易发生。所产生的真正的病理变化,在很大程度上取决于所摄食的卵囊量。因此,很难把致病力归咎于特定的虫种,由于鉴定球虫的"虫种"是极为困难的,所以对于某一种宿主体内有几种球虫,以及究竟是哪一种特别重要,至今还是有不少的争论。

2、化学、生物和营养学方法防治球虫病研究进展

2.1化学药物防治球虫病

自从20世纪50年代启用了化学合成抗球虫药尼卡巴嗪和氨丙啉后,药物就成了防治球虫病最有效、最便捷、最常用的方法。常用的方法是把抗球虫药作为饲料添加剂,用在轮换用药和穿梭用药方案中。抗球虫药大致可分为两类:一类是聚醚类离子载体抗生素,主要有莫能菌素、拉沙里菌素、盐霉素、山杜拉霉素、海南霉素。这类药物的出现使球虫的防制措施发生了彻底的变革,它们的作用机制是提高球虫体细胞膜对钾、钠、钙、镁等离子的通透性,使细胞内外形成较大渗透压差,水分大量进入,虫体细胞膨胀破裂而死亡,故这类药属于杀虫药,理论上讲不易产生抗药性,但近年来有关这类药的抗药性报道增多,特别是莫能菌素的效果明显下降;另一类是化学合成类抗球虫药,主要有磺胺类、球痢灵、氯羟吡碇、氯苯胍、氨丙啉、尼卡巴嗪、痢特灵、常山酮、百球清等,这类药物的作用机制较复杂,有的影响球虫的发育过程,如磺胺类药物阻断球虫的氨基甲酸和叶酸的代谢途径,氨丙啉阻断球虫体细胞的糖代谢过程;有的影响虫体的线粒体功能,如喹啉类和吡碇类阻断虫体线粒体的电子转运过程。

杨振中等(1986)报道了国产尼巴嗪对鸡球虫病的防治研究。作者以1×10-4-4×10-4剂量分批进行笼饲试验,结果表明1.25×10-4的剂量对盲肠球虫和小肠球虫都有效。作者还以小鼠对国产尼巴嗪进行了急性和慢性毒性试验。结果说明:小鼠的急性毒性试验,每公斤体重2400mg、4800mg是安全的;鸡的急性毒性试验,每公斤体重2400mg、3000mg、4800mg、9600mg也是安全的。鸡的慢性毒性试验,药的剂量为2×10-4、、4×10-4、8×10-4,连续投服40天,无中毒死亡,生长发育与不给药对照组相似。吴薛忠等(1990)进行了水溶性氨丙啉治疗柔嫩艾美耳球虫病的笼饲试验。试验以抗球虫指数为判定药效标准。试验结果表明20%的水溶性氨丙啉的抗球虫指数为188.01,达到高效水平。聂奎等(1994)用海南霉素进行了预防柔嫩艾美耳球虫的疗效试验。15日龄鸡每只人工感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊10万个,给予5×10-6的海南霉素钾拌饲,有很好的预防效果,其存活率为100%,血便记分0.44,病变记分1.13,抗球虫指数为172.75,与感染不给药组抗球虫指数相比,差异极显著(P<0.01)。黄兵等(2002)用海南霉素对鸡球虫病的预防和治疗效果作了评价试验,结果在预防试验中海南霉素的平均抗球虫指数为182,病变记分减少96%,粪便和盲肠的卵囊数减少98%,粪便记分为0;在治疗试验中,海南霉素的平均抗球虫指数为146,病变记分减少33%,粪便和盲肠数减少53%。雷治海等报道,三字球虫粉ESBD(含20%SPZ+5%DVD)低剂量(含药物1g)、中剂量(含药物1.5g)、高剂量(含药物2.5g)对人工感染球虫的抗球虫指数分别达175.54、186.46、189.73。说明了二甲氧苄氨嘧啶(DVD)有增强磺胺氯吡嗪钠(SPZ)抗球虫作用。马俊英等(2004)报道,德国拜耳公司研制的三嗪酮类抗球虫药妥曲珠利(商品名:Baycox),按12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的3个剂量对每只感染6×105孢子化球虫卵的的抗球虫指数分别为179.2,197.8,198.2。

2.2疫苗免疫预防球虫病

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用药物防制球虫病虽然取得了很大进展,但是由于任何一种抗球虫药在使用一段时间后都会遇到球虫的耐药性,尽管交替使用不同的抗球虫药能改善这种情况,但这种改善并不能持久,而且很难确定该把哪些药结合应用以及隔多久就应改变用药方案。鉴于这些原因,出现了用疫苗免疫接种以预防球虫病的方法。接种方法主要进行喷雾,可以在孵化房中进行粗喷雾,也可以对育雏箱里的一日龄进行喷雾。另外还可将疫苗喷到饲料上,或将其注入鸡的饮水器或饮水奶头中,通过饮水进行接种。时至今日,球虫活苗接种的研究方法和商品化已经很成熟,并已取得令人满意的效果。加拿大和美国对肉鸡接种活球虫疫苗都取得了良好的效果。在欧洲尚未对肉鸡进行免疫接种,原因之一是疫苗中所用的虫株是有致病性的,可引起发病。法国用弱毒苗paracox进行免疫接种,表明弱毒可充分取代强毒接种法。

2.3营养调控预防球虫病

美国学者Danforth和Allen通过研究发现,在饲料中添加2.5%~10%鱼油、10%亚麻子油或10%亚麻油与不加此添加剂的饲料相比,在给接种球虫疫苗后,柔嫩艾美球虫急性发病盲肠病变显著减轻而且保持了增重,喂饲n-3FA高含量饲料的感染盲肠显微组织学发现减少虫体侵入和发育。据推测,n-3FA进入宿主组织后,通过过氧化产生氧化应激对虫体发育有损害。所谓氧化应激即细胞氧化剂原和抗氧化剂之间的平衡受到干扰使之有利于氧化剂原。另发现,n-3FA高含量的饲料不能保护免受寄生于小肠中段的巨型艾美球虫的感染,感染柔嫩艾美球或巨型艾美球虫的饲喂添加5%鱼油或15%亚麻籽饲料的效果比较表明,两种饲料均可减轻柔嫩艾美球虫感染的病变,而对巨型艾美球虫病感染的病变没有影响。

维生素E能使柔嫩艾美球虫繁殖率降低51%,但明显地刺激堆型艾美球虫繁殖率高达213%。维生素E对于球虫很重要,但感染柔嫩艾美耳球虫时,每公斤饲料中添加100IU维生素E可获得降低死亡率和提高增重的效果。自然感染球虫病的肝中,维生素A的储存量较低。在田间条件下,维生素A有促进球虫病康复的作用。每公斤饲料中添加17600IU维生素A饲喂感染堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫及毒害艾美耳球虫的鸡只,发现对鸡生长及食欲均有类似的促进效果。

甜菜碱可增强各种抗球虫药的活性。甜菜碱和盐霉素合用,可更好地促进受球虫感染的增重和饲料转化率,减轻肠道病变,降低死亡率。体外培养表明,接种基质中甜菜碱的浓度不致对培养细胞具有毒性作用时,也不能抑制巨型艾美球虫和堆型艾美耳球虫对细胞的侵害作用,但甜菜碱能影响球虫在体内的发育及侵害力。在不加抗球虫药的情况下,甜菜碱显著抑制这两种球虫的侵害作用。单独应用盐霉素,对侵害作用的抑制程序也与单独应用甜菜碱时相同。甜菜碱的作用可能不仅在于抑制球虫侵害性和发育,可能还包括增强胃肠道的完整性和功能,得以克服球虫感染。

埃及的Shalaby博士发现,Aquazyme对柔嫩艾美耳球虫卵囊的活性和感染性有不利影响,尤其在麦秸和锯末垫料中。这种化学物质的活性成分可分解卵囊壁,增强渗透性,因此形成了不利于球虫生活的环境。据此,Shalaby博士计划将这种酶引入球虫病控制方案中。他比较了3种不同方案,田间条件下,在埃及Ghaarbia省的9个肉场,这些场均有连续发生严重球虫病的历史。9个场均分为3个组,所有这些场保持5000只肉的规模,自动供水和人工喂料。第1组中划出50m2的垫料以每3L水50mg的浓度在0和25日龄时喷雾Aquazyme;第2组中采用同一种方法,这组日粮中也加入抗球虫药预防;第3组在日粮和饮水中加入抗球虫药。由试验发现,受试组每日死亡率:第1组为0.06%~0.08%;第2组仅为0.05%~0.09%,而第3组为0.8%~1.8%。在所有3个组中死亡率和病变计分随日龄而变化。第3组中高死亡率是由于柔嫩艾美耳球虫的自然感染,尽管在日粮和饮水中使用各种抗球虫药。原因可咎于抗药性或抗球虫药在日粮中分布不均匀。上述资料说明,使用Aquazyme对控制球虫病有极大的帮助。分别在0日龄和25日龄喷雾不仅证明有效而且也有更好地饲料转化率。从营养学角度研究控制球虫病的方法已有近40年的历史,但近几年发现的n-3FA、甜菜碱以及一些生物酶对球虫致病力的抑制作用更具有实用价值,已经形成球虫生物学研究的新热点。这些方法的优势很明显,解决了抗球虫药的残留及毒副反应问题,也避开了球虫活苗接种可能引起的亚临床球虫病的危险。此外,家禽肉蛋中n-3FA的含量高对人类冠状动脉疾病具有治疗效应。因此,从日粮营养及生物酶角度开展防制球虫病的研究值得引起国内研究人员重视。

3、中药防治球虫病研究进展

3.1中草药防治球虫病的机理

直接杀死虫体或抑制虫体、虫卵,增强机体的非特异性和特异性免疫力,缓解临床症状。中药对对未孢子化柔嫩艾美耳球虫卵具有抑制成熟作用,且随着作用时间的延长,成熟率降低;用中药处理孢子化柔嫩艾美耳球虫卵后,可降低其对的致病性减弱。同时中药可提高外周血液淋巴细胞尤其是T淋巴细胞的数量,可明显提高机体的细胞免疫水平和体液免疫。

马海利等人研究认为中药是通过抑制未孢子化卵囊的成熟,杀灭孢子化卵囊,提高外周血液淋巴细胞尤其是T淋巴细胞数量,提高免疫器官中T、B淋巴细胞的数量和活性来达到抗球虫的目的。彭广辉认为中药复方制剂以驱虫解毒为主,辅以健胃燥湿、止痢止血等药物使之相互协调,产生全方位的协调作用和对机体有利因子的整体调动,从而达到抗虫、治疗的效果。同时部分中草药能够缓解球虫病感染鸡的临床症状,因中药对球虫病引起的继发感染(如梭菌)有一定的抗菌作用。

3.2中草药防治球虫病的研究进展

刘玉良用常山,柴胡两味药组方,煎汤拌料治疗球虫病,有效率达94%。法国从常山中提取常山酮,经结构修饰后开发出“建丹”,用于防治禽球虫病,有良好效果。寥世鹏等以常山、柴胡、苦参、青蒿、地榆炭、白茅根配合而成的“驱球散”抗柔嫩艾美耳球虫的效果优于克球粉和SMZ与青霉素合用。聂奎等用黄芪、白头翁、苍术、乌梅、苦参、黄柏、地榆、白茅、薏仁组方,按饲料量的0.5%添加,其抗球虫指数达179.7。陈东晓等报道,马齿苋、地锦草、车前草各30g,煎汁饮服,对球虫病的预防治疗效果显著,凤尾草、铁苋菜各60g,煎汁代水饮,连服5一6d,治球虫病疗效在85%以上。杨再昌根据球虫的病因、发病机制、病理变化和症状,结合中兽医辨证论治的原则,设计了以土大黄30%、黄柏30%、黄芩40%比例配方的中药添加剂,在抗球虫方面取得较理想效果ACI值达194.3。发生球虫病时,崩解的肠道上皮细胞变为有毒物质,蓄积在肠管中不能迅速排出,使机体发生自体中毒。土大黄具有泻下作用,能促进肠管中有毒物质的排出。同时设计的涩肠止泻组(石榴皮60%,诃子40%)无效,说明针对球虫病的血便宜”通”不宜”塞”。苦艾树的煎药主要成份是青蒿(Artemisinin),纯青蒿素对预防球虫感染有一定的作用但这种作用取决于感染后饲喂药物的时间(P.C.Allenetal,1997)。兰州畜牧与兽药研究所研制的中草药添加剂“敌球灵”经多批抗人工感染柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)试验检测,抗球虫指数(AIC)为172.5。李蕴玉等在《中药制剂对鸡球虫病的疗效》报道称以白头翁、苦参清热燥湿杀虫为主药,白茅根、地榆、乌梅等凉血止血,涩肠止泄为辅药,加之提高细胞免疫的黄芪,诸药相伍,共奏清热燥湿、杀虫止痢、凉血止血、收敛止泄、并提高机体抵抗力之功效。治疗雏球虫病的存活率达100%,相对增重率为94.94,平均血便记分1.0,病变值和卵囊值均为5,抗球虫指数183.94,为高效抗球虫药。张西臣等报道,以常山和柴胡等7味中草药组成的球虫散按1%以上添加于饲料中抗球虫指数达180以上,具有高效抗球虫作用。马海利等(2001)报道,以青篙、使君子、大黄、当归、地榆等中药组成的抗球虫制即对孢子化球虫卵的抗球虫指数达187。张铁等(2003)以纯中药制剂球宁(主要成份:青篙、仙鹤草、硫磺、穿心莲、白芍、金银花、甘草)防治球虫病,以1%的添加量于饲料效果最佳,ACI达199.6,并能提高只的增重率。聂奎等用黄芪、白头翁、苍术、乌梅、苦参、黄柏、地榆、白茅、薏仁组方,按饲料量的0.5%添加,其抗球虫指数达179.7。寥世鹏等以常山、柴胡、苦参、青蒿、地榆炭、白茅根配合而成的“驱球散”抗柔嫩艾美耳球虫的效果优于克球粉和SMZ与青霉素合用。

3.3中草药治疗球虫病的展望

我国中药药源广泛,资源丰富,各种均可因地制宜,就地取材,充分利用当地中药材资源的优势,在现代医药学理论的指导下,应用中兽医传统理论和现代生物工程技术,经过科学的加工处理后应用,将受到广大用户的普遍欢迎和重视。以最少的投入获得最大的经济效益,大有可为。鉴于目前国内外迫切要求解决滥用抗生素、化学合成药物和激素类药品带来的肉、蛋、奶畜产品中残留、耐药性、毒副作用,并给人类健康造成危害等问题,中草药具有毒副作用小和抑杀球虫、增强体免疫功能、促生长、球虫对其不易产生耐药性等优点,这就揭示中药抗球虫制剂的研究与开发具有广阔的前景。

  

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