高致病性猪蓝耳病病毒PRRSV 的分子生物学研究进展 prrsv病毒

高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)的

分子生物学研究进展

摘 要:略

关键词:高致病性猪蓝耳病病毒分子生物学防控

高致病性猪蓝耳病是高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highpathogenic porcine reproductive andrespiratory syn—drome)的俗称,是由发生一定程度变异的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcinereproductive and respiratory syndromeviruse,PRRSV)引起的一种高发病率、高死亡率、低治愈率的猪病,与经典的蓝耳病在临床特征和病原核酸分子水平有明显的区别。

、高致病性猪蓝耳病的流行情况

高致病性猪蓝耳病主要表现为母猪繁殖障碍,呈现流产、死胎、木乃伊胎及弱仔等症状,仔猪及育成猪表现为呼吸系统困难等症状。1987年首次爆发于美国,之后分离并鉴定该病病原为PRRSV,并确定存在北美型和欧洲型分离株。由于没有采取有效的防治措施,2006年PRRS在我国大部分省份流行起来,给养猪业造成了极大的损害,即所谓的“猪无名高热”,又称“猪高热综合症”。后经证实这种猪高热病的主要病原为一类具有某些共同变异特征的猪繁殖与呼吸综合征病毒,称高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒,其变异主要表现在GP5基因的点突变和Nsp2基因缺失。

目前,我国高致病性猪蓝耳病存在以下一些流行特点:传播速度快、发病率高、多病原混合感染严重,疫情具有一定的空间分布特征。北方省份感染率较低,2002年开始在一些省份发病,此后逐年严重;季节性分布特点:南方省份每年5月中下旬开始发病,7~9月份为流行高峰期;北方省区疫病出现在7月中下旬,8~10月份为流行高峰期,个别省区延伸到12月;与极端天气变化等相关流行病学因子有关;2007年发病达到一定高峰,随后有降低趋势,有些区域已经处于感染平衡状态,个别地区仍有散发病例。

、病原特性

PRRSV是单股正链有囊膜的RNA病毒,直径50~65nm,表面相对平滑,内有—个呈二十面体对称具有电子致密性的核衣壳,核心直径25~35nm,外绕一脂质双层膜。偶尔在细胞外病毒粒子负染样品的表面可观察到短的(8~12nm)颗粒状突起。一般认为PRRSV的抵抗力不强,在不同环境里其存活时间不一样,在-0℃和-20%时能长期稳定存在数月到数年。PRRSV的一个显著生物学特性是对巨噬细胞的亲嗜性,巨噬细胞是首选细胞,PRRSV在细胞中呈杀细胞性复制,引起典型的细胞病理变化(CPE),表现为在被感染的细胞单层表面形成细胞团,细胞变圆,细胞核固缩、脱落、溶解。但也有极个别毒株在细胞上不出现CPE。

根据基因序列的不同将PRRSV分为两个大类型,即美洲型(代表株为VR2335)和欧洲型(代表株LV),并与鼠乳酸脱氢酶病毒(LDV)、马动脉炎病毒(EAV)一起归为动脉炎病毒科。由于基因序列的差异,所以欧、美毒株有抗原性差异。与所有的RNA病毒一样,PRRSV具有高度的变异性,易形成一个异源的种群,产生病毒血症和相应的抗体。PRRSV形态有多种,以球形为主,直径一般为45-72 nm,核衣壳大约有25-35 nm。从自然发病猪中分离的PRRSV没有血凝活性,不凝集鸡、鹅、豚鼠、牛、马、猪、绵羊和人的红细胞。病毒经过乙醚和吐温280处理后具有血凝活性,但PRRSV的这种血凝活性又可受到PRRSV特异性抗血清所抑制。PRRSV的热稳定性差,感染滴度在56℃15—20min,37℃10—24h,20℃、6d条件下可降l0倍;56℃45min、37℃48h以后可以被灭活,4℃可存活1个月,-70℃感染滴度可以稳定4个月,保存1年以上。在血浆中的存活时间不超过5 d,pH值高于7或低于5时,感染力可以减少90%以上。发病猪场的猪出场后,3周内仍有感染力。PRRSV能在灌流收集的肺泡巨噬细胞(PAM)上生长,在传代的CRL11171、猴肾细胞系CL2621、MARC2145等细胞上生长,在这些细胞系上均能产生明显的细胞病变(CPE)。LV在PAM生长较好,在其它细胞系上培养则毒价很低,而美洲株在所有细胞系上生长都较好。

三、分子结构

PRRSV基因组全长约15.0Kb,不分节,含8个开放阅读框架(openreading framea,ORFs),从5’到3’端依次为ORFla,ORFlb和ORF2一ORF7,每个ORF(从ORF1一ORF7)和相邻的ORF部分重叠。在其5’和3’端分别有一非编码区,在5’非编码区前有一个“帽子”结构,3’非编码区后有多聚腺苷酸(PolyA)尾巴。ORFla和ORFlb组成了80%的病毒基因组,编码病毒的复制酶-RNA聚合酶。ORF2-ORF7编码病毒的结构蛋白,其中ORF2-ORF5编码病毒的糖基化蛋白,ORF6编码膜基质蛋白(M蛋白),ORF7编码核衣壳蛋白(N蛋白)。

PRRSV基因组通过产生6个亚基因组mRNA来进行表达。这些mRNA具有来自病毒基因组RNA5端编码区的共同前导序列,其长度超过200个碱基,并且3’端形成嵌套式结构。每个mRNA只有5’端的ORF被翻译成蛋白。应用Northern印迹杂交试验证实了mRNA2-7与ORF2-7的相关性。

四、遗传变异

、致病机理

六、分子生物学诊断

七、疫苗的研究

八、小结

wearsong谭文盛

高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)的分子生物学研究进展 prrsv病毒

2012年1月25日

  

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